黃曲霉總量快速檢測卡
使用說明書
(膠體金法)
1 原理及用途
本產(chǎn)品應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成,用于檢測谷物、飼料等樣品中的黃曲霉總量(Aflatoxin,AFT)。
樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后,樣本溶液中的黃曲霉與金標(biāo)抗體相結(jié)合,從而阻止金標(biāo)抗體與纖維素膜上黃曲霉偶聯(lián)物結(jié)合。當(dāng)樣本溶液中的黃曲霉含量大于檢測*檢測線不顯色,結(jié)果為陽性;當(dāng)樣本溶液中黃曲霉含量小于檢測*檢測線顯紫紅色,結(jié)果為陰性。
2 技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑卡靈敏度:1ppb(ng/ml)
對樣本的終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。
2.2 樣本檢測下限:
谷物、飼料、糧油……………5ppb
3 試劑盒組成
檢測卡…………………………50個/盒
說明書…………………………1份
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:均質(zhì)器 、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 試劑:甲醇,正己烷
5 樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結(jié)果。
5.2 配液:
配液1:樣本提取液
70%甲醇,即V甲醇:V去離子水=7:3。
5.3 樣本前處理步驟:
5.3.1 谷物、飼料
1)稱取1g粉碎樣本于離心管中,再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
檢測下限 | 5ppb | 10ppb | 20ppb | 50ppb |
樣本提取液 | 2ml | 4ml | 8ml | 20ml |
振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。
2)取0.1ml上清,加入0.15ml去離子水,混勻備用。
5.3.2 糧油(菜油、麻油、色拉油、花生油等)
1)稱取1g樣本于離心管中,再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液
檢測下限 | 5ppb | 10ppb | 20ppb | 50ppb |
樣本提取液 | 2ml | 4ml | 8ml | 20ml |
然后加入8ml正己烷,振蕩5分鐘,室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘。
2)去除上層液體,取0.1ml下層液體加入0.15ml去離子水,混勻備用。
6 實驗步驟
6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上。
6.2 用配套吸管吸取已準(zhǔn)備好的樣本液體,緩慢、逐滴的(應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生)滴加2-3滴(約60ul)到加樣孔(S)內(nèi)。
6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。超過10分鐘的結(jié)果只能作為參考。
7 結(jié)果判斷
陰性:C線、T線均顯色,表示樣品中濃度低于檢測限,或不含有。
陽性:C線顯紅色,T線不顯色,表示樣品中濃度高于檢測限。
無效:未出現(xiàn)質(zhì)控C線,表明操作過程不正確或檢測卡已失效。
8 注意事項
8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
8.2 檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。
8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待檢樣本溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染,否則容易導(dǎo)致阻塞、顯色不明顯等異?,F(xiàn)象,從而影響實驗結(jié)果的判定。
9 黃曲霉總量快速檢測卡貯藏及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。
保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。