(229E/NL63)熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒?
該病感染可能表現(xiàn)亞臨床癥狀，伴有較低的死亡率和產(chǎn)蛋率下降，會(huì)引起肝脾腫大綜合征和大肝大脾病等，因此靈敏快捷的診斷產(chǎn)品具有重要的意義。本產(chǎn)品基于PCR原理開(kāi)發(fā)。它具有下列特點(diǎn)：
一站式，用于不需要單獨(dú)準(zhǔn)備每種成分，包括引物和對(duì)照。
根據(jù)冠狀病毒的保守基因序列設(shè)計(jì)的引物，具有良好的特異性。
基于染料法qRT-PCR檢測(cè)，靈敏度比常規(guī)RT-PCR高10-100倍，可以達(dá)到至少1000拷貝/反應(yīng)。
使用一管式qRT-PCR技術(shù)，RT和PCR兩步在一個(gè)試管內(nèi)完成，不需要中間轉(zhuǎn)移樣品，降低了操作誤差和可能的污染。
本產(chǎn)品足夠50次30μL體系的RT-PCR，只能用于科研，不能用于臨床。
成 份 十孔盒包裝
2×qRT-PCR 緩沖液 500 μL(棕色管)
10×qRT-PCR酶混合液 100 μL(紅蓋)
ROX染料I 50 μL(棕色管)
ROX染料II 50 μL(棕色管)
熒光PCR模板稀釋液 1mL(亮黃蓋)
冠狀病毒RT-PCR引物混合液 100 μL(白蓋)
冠狀病毒RT-PCR陽(yáng)性對(duì)照
(1×10E8拷貝/μL) 50 μL(黃蓋)
核酸釋放劑試用裝 20次(1mL，綠蓋)
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。陽(yáng)性對(duì)照需要因易污染其他成分需要單獨(dú)放置。本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供DNA段作為陽(yáng)性對(duì)照。
成分 N+2個(gè)制備所得樣品 RT-PCR陰性對(duì)照 RT-PCR陽(yáng)性對(duì)照(2-7管)
2×qRT-PCR 10μL 10μL 各10μL
緩沖液
口蹄疫病毒RT-PCR 2μL 2μL 各2μL
引物混合物
50×ROX (見(jiàn)注) 0.4μL 0.4μL 各0.4μL
樣品制備所得RNA模板 5.6μL 不加 不加
(來(lái)于第8步)
稀釋所得6個(gè)陽(yáng)性對(duì)照 不加 不加 各5.6μL(2號(hào)樣到2
(來(lái)于第6步) 號(hào)管，3號(hào)樣到3號(hào)管…)
10×qRT-PCR 2μL 2μL 2μL
酶混合液
注:需使用ROX染料I的機(jī)型：ABI Prism7000、7300、7700、7900HT、Step-One、Step-One Plus。
需使用ROX染料II的機(jī)型：：ABI Prism 7500、7500Fast、MJ Research的Chromo4、Opticon(II)Corbett Rotor Gene 3000。
不需要使用ROX的機(jī)型：Thermal Cycle Dice Real Time System， LightCycler、Smart Cycler System、Agilent Mx3000P、RotorGene 3000、RotorGene 6000。
上機(jī)后按下面參數(shù)進(jìn)行RT-PCR(參數(shù)可能會(huì)因儀器不同而需優(yōu)化)。
如果把本試劑盒用于定量檢測(cè)，則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的log值為橫軸，以Ct值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。再以待測(cè)樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上推算出樣品DNA濃度的log值，再推算出其濃度。
如果把本試劑盒用于定性檢測(cè)，只判斷陽(yáng)性或陰性，則陰性對(duì)照Ct必須大于或等于40。陽(yáng)性對(duì)照必須有熒光對(duì)數(shù)增長(zhǎng)，有典型擴(kuò)增曲線(xiàn)，Ct值應(yīng)該小于或等于30。對(duì)待測(cè)樣品，如果其Ct大于或等于40則為陰性，如果小于或等于35則為陽(yáng)性。如果在35-40之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的Ct值如果大于或等于40則為陰性，如果小于40，則為陽(yáng)性。
(229E/NL63)熒光PCR核酸檢測(cè)試劑盒?
0152甲型流感病毒N1亞型(IAV-N1)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-P48T
0132甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-P48T
0122甲型流感病毒H1亞型(IAV-H1)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-P48T
0114豬流感(SIV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)48T
0112甲型流感病毒(IAV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)48T
0151甲型流感病毒H1N1 2009型(IAV-H1N1 200948T
0141禽流感病毒H5/H7/新城疫病毒(AIV-H5/H7/NDV48T
0131禽流感病毒H5/H7/H9亞型(AIV-H5/H7/H9)核48T
0121禽流感病毒H5/H7亞型(AIV-H5/H7)核酸檢測(cè)試劑盒48T
